总大肠菌群 | 滤膜法与纸片快速法

总大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示水中是否有粪便污染。总大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。粪便是人类肠道排泄物，粪便内除一般正常细菌外，也会有一些肠道致病菌存在（如沙门氏菌、志贺氏菌等），因而水中有粪便污染，则可以推测该水存在着肠道致病菌污染的可能性，必须看作对人体健康具有潜在的危险性。

目前，用于检测大肠菌群的方法有多管发酵法、滤膜法、纸片快速法、酶底物法等。但是小编发现在行业存在将滤膜法和纸片快速法弄混的现象，认为纸片法是不用抽滤的滤膜法，其实这是两个完全不同的检测方法，今天我们来了解一下这两个方法的基本原理、操作步骤及优缺点等。

用孔径为 0.45 μm 的微孔滤膜过滤水样后,将滤膜贴在选择性培养基上培养后，能形成典型菌落经革兰氏染色和证实试验，来检测水中总大肠菌群的方法。

图 2 滤膜法操作步骤

纸片快速法

按最大可能数（MPN）法，将一定量的水样以无菌操作的方式接种到吸附有适量指示剂（溴甲酚紫和2，3，5-氯化三苯基四氮唑即TTC）以及乳糖等营养成分的无菌滤纸上，在特定的温度（37℃）培养18-24h，当细菌生长繁殖时，产酸使pH值降低，溴甲酚紫指示剂由紫色变黄色，同时，产气过程相应的脱氢酶在适宜的pH范围内，催化底物脱氢还原TTC形成红色的不溶性三苯甲臜（TTF），即可在产酸后的黄色背景下显示出红色斑点（或红晕）。通过上述指示剂的颜色变化就可对是否产酸产气作出判断，从而确定是否有总大肠菌群存在，再通过查MPN表就可得出相应总大肠菌群的浓度值。